NIP7促进泛素缀合酶E2 C表达介导甲状腺未分化癌细胞增殖及肿瘤生长

NIP7促进泛素缀合酶E2 C表达介导甲状腺未分化癌细胞增殖及肿瘤生长

<bold>目的：</bold>探讨核仁前rRNA加工蛋白NIP7（NIP7）在维持甲状腺未分化癌（ATC）恶性表型中的作用及分子机制。<bold>方法：</bold>利用基因表达谱芯片（GSE33630）、蛋白质组学数据集（IPX0008941000）和Dependency Map数据库分别分析NIP7在ATC组织中的表达及细胞上的基因敲除效应。通过蛋白质印迹法检测NIP7在正常甲状腺细胞、甲状腺乳头状癌细胞和ATC细胞上的表达及定位。在ATC细胞上转染小干扰RNA并用定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）和蛋白质印迹法检测NIP7的沉默效率...

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Bibliographic Details
Main Authors: 龚 荧荧, 方 籽雯, 王 艺璇, 葛 明华, 潘 宗富
Format: Article
Language:Chinese
Published: Zhejiang University Press 2025-06-01
Series:浙江大学学报. 医学版
Subjects:
甲状腺未分化癌
核糖体生物合成
核仁前rRNA加工蛋白NIP7
泛素缀合酶E2 C
DNA复制
Online Access:https://www.sciengine.com/doi/10.3724/zdxbyxb-2024-0708
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Description
Summary:<bold>目的：</bold>探讨核仁前rRNA加工蛋白NIP7（NIP7）在维持甲状腺未分化癌（ATC）恶性表型中的作用及分子机制。<bold>方法：</bold>利用基因表达谱芯片（GSE33630）、蛋白质组学数据集（IPX0008941000）和Dependency Map数据库分别分析NIP7在ATC组织中的表达及细胞上的基因敲除效应。通过蛋白质印迹法检测NIP7在正常甲状腺细胞、甲状腺乳头状癌细胞和ATC细胞上的表达及定位。在ATC细胞上转染小干扰RNA并用定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）和蛋白质印迹法检测NIP7的沉默效率。进一步利用CCK-8法检测细胞增殖能力，平板克隆实验检测克隆形成能力，裸鼠皮下成瘤实验评估肿瘤生长。使用嘌呤霉素掺入实验结合免疫共沉淀验证沉默NIP7对泛素缀合酶E2 C（UBE2C）翻译的影响。最后通过基因集富集分析筛选NIP7和UBE2C的共同通路并利用qRT-PCR进行验证。<bold>结果：</bold>与正常组织及甲状腺乳头状癌组织比较，NIP7在ATC组织中显著上调，且在不同ATC细胞上均有较强的基因敲除效应。ATC细胞中NIP7蛋白相对表达显著高于人正常甲状腺细胞，且主要表达于细胞核。沉默NIP7显著抑制不同ATC细胞的增殖能力，并减少细胞克隆形成数。体内研究显示，敲除NIP7可显著减缓ATC裸鼠异种移植瘤的生长速度，并且肿瘤体积和质量均小于对照组（均P&lt;0.05）。机制研究表明，沉默NIP7可引起UBE2C新生蛋白表达下调，而不影响UBE2C信使RNA表达。与对照组比较，沉默UBE2C显著抑制ATC细胞增殖（P&lt;0.01）和克隆形成能力（P&lt;0.05），且过表达UBE2C可逆转沉默NIP7对细胞增殖的抑制作用（P&lt;0.01）。基因集富集分析表明NIP7和UBE2C共同参与DNA复制，沉默NIP7或UBE2C均可明显下调DNA复制通路中DNA聚合酶ε催化亚基2和复制因子4的表达水平。<bold>结论：</bold>NIP7通过促进UBE2C翻译介导DNA复制，从而促进ATC生长。
ISSN:1008-9292

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